贝克曼库尔特细胞质控品（Immuno-Trol Cells）6607077说明书

细胞质控品说明书

【产品名称】

通用名称：细胞质控品

英文名称：Immuno-Trol Cells

【包装规格】

60测试/盒

【预期用途】

本产品用于使用单克隆抗体试剂和流式细胞仪进行免疫表型分析，细胞质控品是一种经过分析的可溶解全血质量控 制产品。此产品作为阳性对照细胞，与全血样品处理方式相同，可以检验靶细胞染色、红细胞溶解、以及用流式细 胞仪分析样品时所用试剂的性能及方法。

使用流式细胞仪进行免疫表型分析涉及到在全血样品中识别和计数靶细胞。在进行流式细胞仪分析之前需将全血样 品用单克隆抗体染色并将红细胞溶解。为此需要一种阳性对照细胞，用于检验试剂性能、样品制备方法以及染色操 作步骤。 1,2在单克隆抗体反应性、红细胞溶解及流式细胞分析方面，阳性对照细胞应能模拟全血样品。IMMUNO-  TROL细胞是一 种经过稳定处理的人类红细胞和白细胞（淋巴细胞、单核细胞、粒细胞）的液体制备物，具有人类 正常全血所具备的细胞溶解、光散射、抗原表达及抗体染色特性。

【检验原理】

细胞质控品包括两种主要的细胞组分，即白细胞和红细胞。白细胞的功能是作为IMMUNO-TROL细胞中的阳性细  胞组分，在靶细胞上具有结合于单克隆抗体试剂抗体组分的表面抗原。红细胞的功能是作为IMMUNO-TROL细胞  中的可溶解组分。IMMUNO-TROL样品首先用单克隆抗体试剂染色，然后将其溶解除去红细胞。之后视需要加入  荧光球，以直接测定绝对计数。对经过染色和溶解处理的IMMUNO-TROL样品进行流式细胞仪分析，即可测定靶  细胞的百分比和绝对计数。用IMMUNOPREP™ 试剂系统及Q-PREP™ 、MULTI-Q-PREP™ 或TQ-Prep™工作站 溶解红细胞、用 COULTER CYTO-STAT® 、CYTO-STAT/ COULTER CLONE®、及 IOTEST®单克隆抗体试剂将 白细胞 表面抗原染色、用Flow-Count™荧光球直接测定绝对计数，即可在经过确认和标准化的COULTER®

EPICS™  XL™/XL-MCL™流式细胞仪上测定期望结果。

【主要组成成分】

本品是一种经过稳定处理的人类红细胞和白细胞液体制备物，悬浮于包含BSA的稳定液中。

注：BSA含量极少，且密封包装，本品在运输、使用过程中对接触者和环境是安全的。

【储存条件及有效期】

2~8℃保存，有效期9个月。

此试剂不可在小瓶标签上的失效日期之后使用。开瓶后的试剂在2~8℃下可保持稳定90天。使用后应将试剂立即放 回2~8℃。不可冰冻。

生产日期和失效日期详见标签。

【适用仪器】

适用于下列型号的流式细胞分析仪，如 FC500 、FC500MPL、EPICS XL/XL-MCL、Altra、Navios 、Moflo、 Gallios 、FACSCalibur、FACSCanto II、FACSAria系列、Influx、PAS-Ⅲ。

【样本要求】

使用流式细胞仪进行免疫表型分析涉及到在全血样品中识别和计数靶细胞。在进行流式细胞仪分析之前需将全血样 品用单克隆抗体染色并将红细胞溶解。为此需要一种阳性对照细胞，用于检验试剂性能、样品制备方法以及染色操 作步骤。 1,2在单克隆抗体反应性、红细胞溶解及流式细胞分析方面，阳性对照细胞应能模拟全血样品。

【检验方法】

1.  确认流式细胞仪已根据厂商及本实验室规程正确地校准和标准化。

2.  将对照试剂和抗体预温至室温。

3.  标记准备放用于试验样品的抗体的试管。

4.  按建议的抗体染色规程，吸适量抗体放入已正确标记的试管。

5.  以相似于处理全血样本的方式，轻轻滚动/倒转对照试剂，使之混合。

6.  向每个试管分装100微升对照试剂。

7.  按抗体染色规程将抗体和对照保温。

重要说明:  如果有试剂小滴残留在试管顶部，必须将其清除。否则未溶解的红细胞可能会污染最终样品，导致 错误结果。可用棉签将其擦掉。

8.  按样品制备方法中的步骤溶解经过染色的对照试剂。

注意: 如果使用Flow-Count荧光球，将Flow-Count荧光球小瓶涡旋混合后向每个要求绝对计数结果的试管中加 入100微升。

9.  按特定抗体试剂的分析规程，用流式细胞仪进行样品分析。选通群体示于期望结果表。

注意：如果使用 Flow-Count Fluorospheres，则必须在加入Flow-Count Fluorospheres后两小时内对制备好的 样品进行分析。

【阳性判断值或者参考区间】

用COULTER EPICS XL/XL-MCL流式细胞仪IMMUNOPREP试剂系统、MULTI-Q-PREP或TQ-Prep工作站、

CYTO-STAT 、CYTO-STAT/COULTER CLONE或IOTEST抗体、以及在适用的情况下用Flow-Count荧光球， 对每个抗原测定平均值。在这些条件下，95%的测得值应该落入标明的期望范围之内。每个实验室应对每个  分析过的抗原建立其平均值和期望范围。如果加入贝克曼库尔特公司的实验室间质量保证计划（IQAP），此计划 提供与其它实验室的数据比较，可以强化本实验室的质量保证计划。

重要须知：请勿将此质控品与以下试剂一起使用：CYTO-STAT®/COULTER CLONE® CD3 ( IgG1)-FITC/B4-RD1 、CYTO-STAT®/COULTER CLONE® B4-FITC 和CYTO-STAT®/COULTER CLONE® B4-RD1。

【检验结果的解释】

如果无法得到预期的结果，或光散射或荧光性质发生漂变，说明产品可能变质。此外还应检查仪器的标准化、样品 制备技术和试剂、抗体染色技术、以及抗体性能。溶血可能说明储存条件不当，也许会在细胞溶解力方面影响产品 性能。

图1: 用IMMUNOPREP试剂系统和MULTI-Q-PREP工作站溶解、用COULTER EPICS XL/XL-MCL流式细胞仪分析 的IMMUNO-TROL细胞的一个代表性双参数侧向散射（SS）对前向散射（FS）直方图

图2: 用IMMUNOPREP试剂系统和MULTI-Q-PREP工作站溶解、用tetraONE™系统在COULTER   EPICSXL/XL- MCL流式细胞仪上分析的IMMUNO-TROL细胞的一个代表性双参数CD45对侧向散射（SS）直方图。

图3: 用CYTO-STAT/COULTER CLONE Mo2-RD1/KC56-FITC (CD14/CD45)单克隆抗体染色、用IMMUNOPREP 试剂系统和MULTI-Q-PREP工作站溶解、COULTER EPICS XL/XL-MCL 流式细胞仪分析的 IMMUNO-TROL 细胞 的一个代表性双参数CD45对CD14直方图。

图4: 用CYTO-STAT tetraCHROME ™ CD45-FITC/CD4-RD1/CD8-ECD/CD3-PC5单克隆抗体染色、用

IMMUNOPREP试剂系统和MULTI-Q-PREP工作站溶解、用tetraONE™ 系统在COULTER EPICS XL/XL-MCL流式 细胞仪上分析的IMMUNO-TROL 细胞的一个代表性双参数CD3对CD4直方图。

【检验方法的局限性】

1.  如果流式细胞仪没有进行适当调准或荧光标准化，或细胞群体选通设置不当，可能会导致错误的结果。

2.  如果使用的流式细胞仪、细胞溶解系统或抗体与测定期望结果时所用的不同，所得结果可能会落到期望范围之 外。

【注意事项】

1.  这种试剂含有少于0.1%的叠氮化钠。叠氮化钠在酸性条件下产生叠氮酸，这是一种极为有毒的化合物。当丢弃 叠氮化合物时，应该用自来水将其冲走。建议采用上述措施是为了避免叠氮化合物在金属管道中沉积，产生导致爆炸的 条件。如果接触到皮肤或眼睛，要用大量的水冲洗。

2.  潜在生物学危险性物质每一份用于制备此物质的人类血液都经过由美国食品和药物管理局（FDA）批准的方法  进行试验，以检测人类免疫缺陷病毒（HIV-1和HIV-2）抗体、丙型肝炎病毒（HCV）抗体、以及乙型肝炎病毒表面抗 原（HBsAg）抗体的存在、结果均为阴性（无可重复的反应）。由于任何试验方法都不能完全排除HIV 、HCV、 乙型肝炎病毒（HBV）或其它感染因子存在的可能性，此样本/试剂应按美国国立卫生研究院疾病控制中心1988 年出版的《微生物和生物医学实验室的生物学安全》手册中建议用于所有具有潜在感染性的人类血清或血液 样品的2级生物安全规程操作。

3.  切勿用嘴吸样，并避免样品与皮肤和黏膜接触。

4.  不可将试剂冷冻。

5.  防止试剂被微生物污染，否则可能会导致错误结果。

6.  应按优良实验室操作规范（GLP）进行此试剂的操作。